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    倒置顯微鏡的使用

    發(fā)布時間: 2022-12-05  點擊次數(shù): 780次

    原理

    將培養(yǎng)物放在顯微鏡的載物臺上,打開電源,選擇合適的鏡頭,聚焦于標(biāo)本。如果必要的話,將聚光器和相差環(huán)調(diào)節(jié)在中心。

    材料與儀器

    倒置顯微鏡 擦鏡紙

    步驟

    1. 確保顯微鏡(配有相差10×、20× 或40× 的物鏡及聚光器和合適的相差環(huán))潔凈(用 70 % 乙醇擦拭載物臺。如果有必要,用擦鏡紙清潔物鏡)。

      2. 打開電源,將燈光強度從最-低開始調(diào)至合適的強度,而不是直接打到強光。

      3. 檢查光源與聚光器的銜接:

      (a)將一張染色切片、培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿放在載物臺上;

      (b)關(guān)閉視場光圈;

      (c)聚焦在可變光闌上;

      (d)將可變光闌成像調(diào)整到視野的中央。

      4. 將相差環(huán)調(diào)至中央:

      (a)如果顯微鏡配有相差望遠(yuǎn)鏡,將之插入標(biāo)準(zhǔn)目鏡位置,然后聚焦于相差環(huán),檢査聚光器環(huán)(黑色背景中的白環(huán))是否與物鏡環(huán)(白色背景中的黑環(huán))同軸;

      (b)如果沒有相差望遠(yuǎn)鏡,則將染色的標(biāo)本換為沒有染色的培養(yǎng)物(活的或固定的培養(yǎng)物),重新聚焦,調(diào)整相差環(huán),直到獲得最-優(yōu)對比。

      5. 觀察細(xì)胞。10× 相差物鏡作為常規(guī)觀察已足夠,4× 相差物鏡不能提供足夠的細(xì)節(jié)資料,而高于 10× 的放大倍數(shù)則限制了觀察區(qū)域。

      (a)注意生長期(例如,稀疏、亞匯合、匯合、致密);

      (b)注意細(xì)胞狀態(tài)(例如,清亮、透明或有顆粒、有空泡等)。

      6. 檢査培養(yǎng)基的清亮程度(例如,無碎片、漂浮的顆粒、污染跡象等),根據(jù)需要選擇一個放大倍數(shù)更高的物鏡。

      7. 記錄觀察的結(jié)果。

      8. 旋低變阻器(把燈光調(diào)暗),關(guān)掉電源。

      9. 將培養(yǎng)液放回孵箱,或放在超凈臺上進行無菌操作。


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